外泌體樣本量太大怎么辦?外泌體來源,幾乎所有細(xì)胞都可以分泌外泌體。在科研中,如何處理大體積外泌體樣本是眾多研究者都覺得十分棘手的問題。目前,常用的分離手段包括超速離心法、尺寸排阻法、沉淀法以及免疫親和法。然而這些分離方法要么只適用于小體積微量樣本,要么就是對儀器要求高、操作復(fù)雜。與各位研究者分享維思克思的大體積樣本處理經(jīng)驗(yàn),愿能為各位研究者提供思路。1.外泌體濃縮試劑。外泌體濃縮試劑可用于大體積外泌體樣本的處理,可以高通量、快速實(shí)現(xiàn)大體積外泌體樣本(如細(xì)胞培養(yǎng)上清、尿液等)的濃縮,濃縮后的樣本后處理后可進(jìn)行外泌體的分離純化、RNA提取、蛋白提取等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。2.超濾管超濾。超濾濃縮是一種常用的分離技術(shù),利用超濾膜對組分進(jìn)行分離。溶液通過超濾膜,利用膜孔的大小選擇性,將分子量較大的物質(zhì)過濾出來,而將分子量較小的物質(zhì)通過膜孔。以上大體積外泌體樣本處理工具,維思克思均有提供。外泌體濃縮試劑以及超濾管在處理大體積樣本上具有突出優(yōu)勢。尤其是外泌體濃縮試劑,操作簡便,濃縮倍數(shù)高,實(shí)驗(yàn)體驗(yàn)有較好的評價(jià),推薦指數(shù)較高。濃縮后的外泌體分離純化,維思克思產(chǎn)品線也非常齊全,包括磁珠法、SEC法等。外泌體研究工具簡化包裝方案,按需定制規(guī)格,降低包裝物料浪費(fèi)。牛奶細(xì)胞外囊泡藥物裝載

外泌體表征系列產(chǎn)品線目前外泌體缺乏有效的定量和表征方法,單一的檢測技術(shù)都有其局限性。維思克思全新系列產(chǎn)品—外泌體表征與定量試劑盒,該系列產(chǎn)品可對現(xiàn)有單一表征與定量方法進(jìn)行補(bǔ)充,通過多維度對分離出的外泌體進(jìn)行評估,使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加科學(xué)、準(zhǔn)確。01BCA蛋白定量試劑盒(WSR0022),具有靈敏度高、顯色速度快、線性范圍廣的優(yōu)勢,可高效快速實(shí)現(xiàn)蛋白定量。02脂質(zhì)定量試劑盒(WSR0028/WSR0028-2),現(xiàn)有的脂質(zhì)定量方法大都需要昂貴的儀器,本產(chǎn)品可代替大型儀器,實(shí)現(xiàn)小成本快速檢測,具有靈敏度高、操作簡便、線性范圍廣等優(yōu)勢。03外泌體RNAQC試劑盒(WSR0013-1),經(jīng)大量研究分析,篩選出2個(gè)陽性外泌體RNA靶標(biāo)和1個(gè)陰性靶標(biāo),用于表征RNA質(zhì)量。04外泌體蛋白標(biāo)志物鑒定試劑盒(WSR0030),針對外泌體標(biāo)志蛋白CD9、CD81、TSG101、Calnexin檢測而研發(fā)的一款方便高效的試劑盒產(chǎn)品,可監(jiān)測實(shí)驗(yàn)體系并準(zhǔn)確檢測到外泌體中的以上蛋白。05外泌體RNA定量試劑盒(WSR0039),檢測線性范圍是0-25ng,比較低檢測限可至0.2ng,靈敏度高。天然EVs源頭工廠外泌體研究工具梯度規(guī)格選擇,滿足不同實(shí)驗(yàn)規(guī)模,成本可控性強(qiáng)。

外泌體作為近幾年的“科研新貴”,可謂是紅極一時(shí)。由于它們具有獨(dú)特的遷移、靶向和選擇性內(nèi)化進(jìn)入特定細(xì)胞的能力,是非常有前途的遞送載體。然而,目前在外泌體研究和應(yīng)用上還存在以下痛點(diǎn):痛點(diǎn)一:由于目前對這些內(nèi)源性囊泡了解還不夠深入,尤其是在體內(nèi)行為方面上,將外泌體治zhi療轉(zhuǎn)診至臨床故而仍為一大難點(diǎn)。體內(nèi)追蹤外泌體可以提供有關(guān)其生物分布、遷移能力、毒性、生物學(xué)的重要知識角色,溝通能力和行動機(jī)制。痛點(diǎn)二:目前對于胞外囊泡的標(biāo)記方法有很多種,包括親脂性的染料(如PKH系列、Dil系列),然而這些染料標(biāo)記方法存在一些不足。維思克思的示蹤探針基于兩項(xiàng)發(fā)明專利,對比其他染色方法,該探針具有低背景、高效率、強(qiáng)耐酸的優(yōu)勢!發(fā)明名稱:1.一種pH敏感型探針分子及其應(yīng)用;2.一種探針分子的合成方法。WSR0001-2工作原理為共價(jià)方式嵌入外泌體膜結(jié)構(gòu)。當(dāng)染料結(jié)合外泌體膜后,可通過熒光顯微鏡準(zhǔn)確觀察到外泌體在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)動與行蹤。突出優(yōu)勢:特異性高,無背景干擾;標(biāo)記效率高,該探針以共價(jià)的方式嵌入胞外囊泡的雙層膜結(jié)構(gòu),優(yōu)于親脂性染料,避免自組裝形成的納米粒子造成信號干擾。在低pH(酸性)條件下也可顯色。
脂質(zhì)定量試劑盒不止于外泌體表征!脂質(zhì)是一大類分子,包括甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯、脂肪、甾醇等。脂質(zhì)不僅是生物膜的骨架成分,保護(hù)細(xì)胞膜的完整性,而且還參與細(xì)胞過程,如膜運(yùn)輸、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞凋亡和能量儲存。脂質(zhì)代謝的紊亂與許多疾病有關(guān),例如阿茲海默癥、糖尿病、肥胖癥、、和神經(jīng)退行性疾病以及某些傳染病等。為了研究脂質(zhì),通常必須首先從組織或細(xì)胞培養(yǎng)物中提取脂質(zhì),然后進(jìn)行定量。脂質(zhì)定量需要昂貴的設(shè)備,例如HPLC、光散射檢測技術(shù)或LatroscanTLC-FID分析儀。WSR0028脂質(zhì)定量試劑盒使用硫代磷酸香草醛法測量樣品的脂質(zhì)含量(不飽和脂肪酸),從而產(chǎn)生適用于多孔板檢測的簡單比色讀數(shù)。首先,將粗制或純化的脂質(zhì)樣品加到96孔板中。然后加入濃硫酸,加熱樣品以溶解總脂質(zhì)樣品,隨后加入脂質(zhì)定量試劑。在酸性條件下,脂質(zhì)與香草醛反應(yīng)形成比色產(chǎn)物,該比色產(chǎn)物易于在酶標(biāo)儀上檢測。維思克思的脂質(zhì)定量試劑盒ExosomalLipidQuantificationKit(Fluorometric)(WSR0028-2)與WSR0028相結(jié)合,可更好表征外泌體,LNP等!外泌體研究工具標(biāo)準(zhǔn)化操作流程,新手也能快速上手,降低培訓(xùn)成本。

沉淀法外泌體分離試劑盒經(jīng)典、操作簡便的外泌體分離方法!假如你沒有超速離心機(jī),假如對提取出的外泌體中含有透明質(zhì)酸等多糖而頭疼不已,那你一定要來試試這款沉淀法分離試劑盒。WSR0026是一款沉淀法外泌體分離試劑盒,可用于多種樣本的外泌體分離,具有操作簡便、分離速度快和外泌體回收率高等特點(diǎn)。分離的外泌體可用于WB分析、NTA或納米流式粒徑分析、電鏡檢測、組學(xué)研究、細(xì)胞和動物功能研究等。使用方法:需要將沉淀試劑加入到樣本中孵育,然后高速離心即可得到外泌體。產(chǎn)品優(yōu)勢:適用范圍廣,血漿、血清等復(fù)雜樣本和細(xì)胞上清、尿液等簡單樣都適用;回收率高,相較于其他方法,獲取的外泌體濃度高;操作簡便,不需特殊設(shè)備,操作簡便;高通量,可同時(shí)處理多個(gè)樣本。產(chǎn)品信息:WisExoExosomeIsolationKit(Precipitation)(WSR0026)。外泌體研究工具長期合作支持政策,持續(xù)技術(shù)服務(wù),降低長期合作成本。大規(guī)模胞外囊泡解決方案
外泌體研究工具完備驗(yàn)證數(shù)據(jù),提供詳細(xì)技術(shù)文檔,減少方法驗(yàn)證時(shí)間。牛奶細(xì)胞外囊泡藥物裝載
外泌體研究常見問題解答122.做外泌體研究,需要多少量的蛋白質(zhì)?不建議過多關(guān)注蛋白質(zhì)濃度,我們的經(jīng)驗(yàn),蛋白質(zhì)測量與制劑中外泌體的數(shù)量之間幾乎沒有相關(guān)性。蛋白量不應(yīng)作為制劑中外泌體數(shù)量的估計(jì)。外泌體與蛋白量并不總是一個(gè)很好的相關(guān)性。我們主要使用細(xì)胞培養(yǎng)基和尿液作為起始樣本,即使在這種“簡單”的溶液中(至少與血漿/血清相比),相關(guān)性也不是很好。這就是為什么我們開始關(guān)注細(xì)胞培養(yǎng)生長條件,并標(biāo)準(zhǔn)化外泌體收獲條件,以便在正確的時(shí)間收獲并提高系統(tǒng)的可重復(fù)性。血漿和血清中蛋白質(zhì)濃度和外泌體含量之間的相關(guān)性會更小。許多研究人員使用納米顆粒跟蹤分析(NTA)來測量囊泡的數(shù)量和大小分布,但這種方法不能提供相同大小范圍內(nèi)任何污染囊泡的信息。因此,電子顯微鏡應(yīng)始終與這種方法相結(jié)合。檢查污染囊泡存在的一種方法可能是進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡以檢測蛋白質(zhì),如gp96,一種ER相關(guān)蛋白。3.外泌體WB鑒定時(shí),選擇哪個(gè)內(nèi)參蛋白?無內(nèi)參蛋白。外泌體包裹的蛋白具有隨機(jī)性,同時(shí)不同細(xì)胞分泌的外泌體具有異質(zhì)性,所以外泌體中沒有哪種蛋白含量是恒定的,也就沒有所謂的內(nèi)參蛋白了。目前的外泌體WB鑒定,只能用于定性檢測。牛奶細(xì)胞外囊泡藥物裝載
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