外泌體研究常見(jiàn)問(wèn)題解答47.外泌體中是否存在18SmRNA？通過(guò)測(cè)序和qPCR分析了外泌體RNA的含量，這些囊泡肯定包括一些18sRNA。早期的論文具有誤導(dǎo)性，一個(gè)團(tuán)隊(duì)聲稱外泌體是miRNA和mRNA陰性的。事實(shí)上，外泌體包含核糖體RNA、tRNA和許多非編碼RNA，并且很大一部分miRNA實(shí)際上與蛋白質(zhì)（例如Ago2）相關(guān)，而不是外泌體。8.外泌體研究的困難是什么？（1）外泌體異質(zhì)性，包括來(lái)源異質(zhì)性、大小異質(zhì)性、成分異質(zhì)性等；（2）高純度的外泌體獲取；（3）外泌體鑒定表征；（4）外泌體保存。外泌體研究工具復(fù)溶后穩(wěn)定性強(qiáng)，多次使用不影響效果，減少浪費(fèi)。Exosome載藥

如何提高細(xì)胞外囊泡產(chǎn)量？盡管基于外泌體具有巨大潛力，但傳統(tǒng)生產(chǎn)方式產(chǎn)量低和放大困難等特點(diǎn)，嚴(yán)重制約了外泌體的臨床應(yīng)用轉(zhuǎn)化。維思克思總結(jié)了提高外泌體產(chǎn)量的方法，包括物理和化學(xué)刺激、增加鈣離子內(nèi)流、細(xì)胞骨架固定、藥物刺激以及特定基因的過(guò)表達(dá)等，可有效提高外泌體表達(dá)量。具體有哪些方法可以提高細(xì)胞外囊泡產(chǎn)量呢？01培養(yǎng)條件。采用3D培養(yǎng)替代傳統(tǒng)2D培養(yǎng)可提高外泌體產(chǎn)量。缺氧可刺激細(xì)胞分泌外泌體。此外，適度降低pH值可顯著提高外泌體的表達(dá)量。02物理刺激。采用物理刺激的方法可明顯增加外泌體的產(chǎn)量。常用物理刺激包括：剪切力、周期性張力、聲音和電場(chǎng)刺激等。03分子干預(yù)。一般來(lái)說(shuō)，細(xì)胞處于應(yīng)激狀態(tài)下會(huì)增加外泌體的分泌。04誘導(dǎo)表達(dá)。脂質(zhì)體通過(guò)內(nèi)吞作用刺激細(xì)胞活性，明顯增加外泌體分泌量。磁性納米微?？纱碳ぜ?xì)胞的內(nèi)吞功能，可增加外泌體表達(dá)。以上這些策略均為來(lái)自特定細(xì)胞和特定條件下所得到的結(jié)果。想跳過(guò)繁瑣的優(yōu)化過(guò)程，直接使用上高產(chǎn)又穩(wěn)定的外泌體培養(yǎng)基嗎？維思克思推出的外泌體培養(yǎng)基(WSC0008)和無(wú)外泌體血清可滿足您的要求！蘋果Exosome臨床試驗(yàn)外泌體研究工具穩(wěn)定批次生產(chǎn)，確保實(shí)驗(yàn)重復(fù)性，降低結(jié)果波動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)。

脂質(zhì)定量試劑盒不止于外泌體表征！脂質(zhì)是一大類分子，包括甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯、脂肪、甾醇等。脂質(zhì)不僅是生物膜的骨架成分，保護(hù)細(xì)胞膜的完整性，而且還參與細(xì)胞過(guò)程，如膜運(yùn)輸、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞凋亡和能量?jī)?chǔ)存。脂質(zhì)代謝的紊亂與許多疾病有關(guān)，例如阿茲海默癥、糖尿病、肥胖癥、、和神經(jīng)退行性疾病以及某些傳染病等。為了研究脂質(zhì)，通常必須首先從組織或細(xì)胞培養(yǎng)物中提取脂質(zhì)，然后進(jìn)行定量。脂質(zhì)定量需要昂貴的設(shè)備，例如HPLC、光散射檢測(cè)技術(shù)或LatroscanTLC-FID分析儀。WSR0028脂質(zhì)定量試劑盒使用硫代磷酸香草醛法測(cè)量樣品的脂質(zhì)含量(不飽和脂肪酸)，從而產(chǎn)生適用于多孔板檢測(cè)的簡(jiǎn)單比色讀數(shù)。首先，將粗制或純化的脂質(zhì)樣品加到96孔板中。然后加入濃硫酸，加熱樣品以溶解總脂質(zhì)樣品，隨后加入脂質(zhì)定量試劑。在酸性條件下，脂質(zhì)與香草醛反應(yīng)形成比色產(chǎn)物，該比色產(chǎn)物易于在酶標(biāo)儀上檢測(cè)。維思克思的脂質(zhì)定量試劑盒ExosomalLipidQuantificationKit(Fluorometric)（WSR0028-2）與WSR0028相結(jié)合，可更好表征外泌體，LNP等！

外泌體表征與定量難在什么地方？又該怎么做？我們拜訪過(guò)很多外泌體研究工作者，其中談到多的是外泌體難以分離，分離后的外泌體不好定量，定量的外泌體數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確等問(wèn)題。03如何表征考慮到外泌體中其他雜質(zhì)對(duì)定量檢測(cè)的影響，建議先進(jìn)行外泌體純度表征，確保外泌體純度在合理范圍內(nèi)，再進(jìn)行外泌體定量。外泌體純度表征可以用顆粒數(shù)/總蛋白、總蛋白/總脂質(zhì)、顆粒數(shù)/總脂質(zhì)、顆粒數(shù)/總核酸、總蛋白/總核酸等，從多個(gè)維度來(lái)評(píng)估外泌體純度。04如何定量外泌體發(fā)揮功能與其所載貨物相關(guān)，對(duì)外泌體定量可以考慮檢測(cè)外泌體中某些分子來(lái)評(píng)估。如某些蛋白標(biāo)志、脂質(zhì)、核酸、糖類等分子。針對(duì)外泌體表征與定量此類問(wèn)題，維思克思不斷嘗試，經(jīng)多次驗(yàn)證終推出了外泌體表征與定量一系列產(chǎn)品。具體產(chǎn)品包括：BCA蛋白定量試劑盒、外泌體脂質(zhì)定量試劑盒、外泌體核酸定量試劑盒、外泌體檢測(cè)抗體、外泌體RNAQC試劑盒、外泌體RNA定量試劑盒。外泌體研究工具小批量試用裝供應(yīng)，適合前期方法學(xué)驗(yàn)證，降低試錯(cuò)成本。

外泌體定量與表征的又一有效補(bǔ)充！外泌體脂質(zhì)脂質(zhì)定量試劑盒（比色法）外泌體由磷脂雙分子層包裹，包含脂質(zhì)等代謝物。目前外泌體缺乏有效的定量和表征方法，單一的檢測(cè)技術(shù)都有其局限性。維思克思的WSR0028可用于外泌體的脂質(zhì)定量，既可測(cè)定外泌體的脂質(zhì)含量，為脂質(zhì)研究提供有力工具，又能作為外泌體定量和表征方法的有效補(bǔ)充?，F(xiàn)有的脂質(zhì)定量方法大都需要昂貴的儀器，例如HPLC儀器、光散射檢測(cè)技術(shù)等。本產(chǎn)品可替代這些儀器，實(shí)現(xiàn)小成本快速檢測(cè)！產(chǎn)品特點(diǎn)：靈敏度高，檢測(cè)脂質(zhì)濃度下限達(dá)到5μg/mL。操作簡(jiǎn)便，需三步即可檢測(cè)出脂質(zhì)含量，整個(gè)操作時(shí)間不超過(guò)40min，節(jié)約時(shí)間。線性范圍廣，5-1000μg/mL濃度范圍內(nèi)有較好的線性范圍。產(chǎn)品信息：ExosomalLipidQuantificationKit(Colorimetric)（WSR0028）。外泌體研究工具快速?gòu)?fù)溶設(shè)計(jì)，減少實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備時(shí)間，提升操作便捷性。Exosome載藥

外泌體研究工具濃縮型試劑配方，同等實(shí)驗(yàn)需求用量更少，降低長(zhǎng)期使用成本。Exosome載藥

相信大家一直都被一個(gè)問(wèn)題困擾，什么樣的外泌體才是好的外泌體呢？采購(gòu)?fù)饷隗w時(shí)，如何判斷外泌體質(zhì)量？現(xiàn)在，我們對(duì)外泌體供應(yīng)商-維思克思的外泌體WSR0014-1進(jìn)行測(cè)評(píng)。咱們來(lái)看看高質(zhì)量的外泌體到底長(zhǎng)什么樣？一、首先對(duì)外泌體進(jìn)行鑒定。首先要證明是外泌體，那如何證明呢？一般從三大基礎(chǔ)表征維度進(jìn)行分析：形態(tài)、粒徑分布、外泌體標(biāo)志蛋白。二、確定外泌體顆粒數(shù)與純度。還需另一重要表征維度外泌體的純度。在做實(shí)驗(yàn)時(shí)，怎樣考察純度呢？不同來(lái)源的外泌體，因獲取樣本的不一致，每種樣本中雜蛋白的含量不盡相同，同時(shí)分離方法也不一定相同，這可能導(dǎo)致不一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。外泌體純度表征可以用顆粒數(shù)/蛋白、顆粒數(shù)/RNA、蛋白/脂質(zhì)、脂質(zhì)/RNA等多個(gè)維度來(lái)評(píng)估外泌體純度，避免mian單一方法的局限性。備注：脂質(zhì)濃度用維思克思WSR0028-2測(cè)量；RNA濃度用維思克思WSR0039測(cè)量。三、評(píng)估外泌體的安全性。如果用來(lái)做細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，外泌體中含有影響細(xì)胞或動(dòng)物的成分，實(shí)驗(yàn)的結(jié)果將會(huì)令人非常詛喪。這次測(cè)評(píng)將外泌體的安全性指標(biāo)進(jìn)行的評(píng)估，包括內(nèi)外源病毒、細(xì)菌、支原體的檢測(cè)，結(jié)果顯示安全性指標(biāo)全部合格。Exosome載藥

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