氧化酶試驗用的鹽酸四甲基對苯二胺，如何配制和保存？

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南京樂診生物技術(shù)有限公司2026-03-11

氧化酶試驗是鑒別革蘭陰性菌的關(guān)鍵試驗，試劑配制和保存不當會導(dǎo)致假陰性或假陽性結(jié)果。配制方法：鹽酸四甲基對苯二胺（TMPD）通常配制成1%水溶液。準確稱取1g TMPD，溶于100mL無菌蒸餾水中，攪拌至完全溶解（溶液應(yīng)為無色或淡黃色）。不可加熱，不可高壓滅菌。溶解后立即過濾除菌（0.22μm濾膜），分裝至棕色小瓶中。保存條件：TMPD溶液極不穩(wěn)定，易被空氣氧化變色。應(yīng)2-8℃避光保存，有效期為1周。如溶液變?yōu)榉奂t色、紅色或紫色，說明已被氧化失效，應(yīng)立即廢棄。更穩(wěn)定的保存方式：將TMPD配制成10%儲存液（溶于DMSO或乙醇），-20℃凍存，可保存3個月。使用時用無菌蒸餾水稀釋至1%工作液。使用要點：1. 使用濾紙法時，將濾紙條浸透試劑，用接種環(huán)挑取新鮮培養(yǎng)物（18-24小時）涂抹于濾紙上，10-30秒內(nèi)觀察顏色變化。陽性呈藍色→紫色。2. 使用直接滴加法時，將試劑直接滴在菌落上，觀察顏色變化。3. 每批試劑使用前應(yīng)用已知陽性菌（如銅綠假單胞菌ATCC 27853）和陰性菌（如大腸埃希氏菌ATCC 25922）驗證。南京樂診提供即用型氧化酶試紙條和安瓿裝氧化酶試劑，每支安瓿為單次使用量，避免了試劑氧化失效問題。