外泌體研究常見(jiàn)問(wèn)題解答35.CD9或CD81等是否對(duì)外泌體起源具有特異性？目前，對(duì)于一般的外泌體標(biāo)記物還沒(méi)有達(dá)成共識(shí)。研究界目前的建議是結(jié)合檢測(cè)許多膜結(jié)合或膜相關(guān)蛋白，以驗(yàn)證膜的存在。靶點(diǎn)CD63和CD81存在于許多不同的外泌體制劑中，CD9也是如此。然而，檢測(cè)到至少2種不同的細(xì)胞系釋放CD9陰性的外泌體（Jurkat細(xì)胞和幾種B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞）。同樣重要的是，通過(guò)對(duì)已知在ER、高爾基體或細(xì)胞核等隔室中表達(dá)的標(biāo)記物進(jìn)行染色，來(lái)證明不存在污染性囊泡。同樣重要的是，用相同的標(biāo)記物來(lái)表征宿主細(xì)胞。6.外泌體中是否包含DNA？一般認(rèn)為外泌體中不包含DNA，或包含少量線粒體DNA。因?yàn)橥饷隗w在胞質(zhì)中形成與包裹貨物，而在胞質(zhì)中存在少量降解的線粒體DNA。目前有一些研究發(fā)現(xiàn)，在外泌體的表面，稱(chēng)之為“corona”，中文叫“冠“或”暈“，在外泌體分泌到細(xì)胞外后，會(huì)吸附微量的游離DNA。外泌體研究工具標(biāo)準(zhǔn)化操作流程，新手也能快速上手，降低培訓(xùn)成本。臍帶間充質(zhì)細(xì)胞外囊泡熒光染料

SEC法外泌體分離試劑盒?；蛟S你想做外泌體相關(guān)研究，卻不知如何下手？或許你苦練提純術(shù)卻不知如何獲得高純度外泌體？現(xiàn)在可以用UniversalExosomeIsolationKit（SEC外泌體分離試劑盒）來(lái)解決以上問(wèn)題了！本產(chǎn)品分離的外泌體純度高、回收率高的特點(diǎn)，能夠滿(mǎn)足絕大多數(shù)科研需求。操作簡(jiǎn)便使用本品時(shí)無(wú)需復(fù)雜設(shè)備、從上樣到外泌體收集只需半小時(shí)。適用范圍廣適用于各類(lèi)樣本，包括但不限于細(xì)胞上清、尿液、血清、血漿等。分離的外泌體結(jié)構(gòu)均一完整、只回收固定范圍的外泌體囊泡。使用方法：樣品與純化柱預(yù)處理后，按純化柱規(guī)格上樣（10mL純化柱上樣1mL；30mL純化柱上樣3mL）。樣本滴完后每次加入0.5mL/1mLPBS緩沖液，每0.5mL/1mLPBS收集一個(gè)餾分。收集完餾分則按照相關(guān)維護(hù)方法維護(hù)柱子即可。WisDelivery BiotechnologyExtracellular Vesicles細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外泌體研究工具簡(jiǎn)易操作設(shè)計(jì)，無(wú)需復(fù)雜設(shè)備，降低實(shí)驗(yàn)室入門(mén)成本。

你真的知道如何正確收集和保存EVs嗎？樣本的收集和保存是導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不確定性的一個(gè)重要來(lái)源。維思克思長(zhǎng)期研究以及不斷試錯(cuò)得出的“EVs樣本收集和保存”經(jīng)驗(yàn)，分享給各位外泌體研究者。血液。血液采集優(yōu)先隔夜空腹。血漿通常是EVs的優(yōu)先來(lái)源，因?yàn)樵谥苽溲鍟r(shí)凝塊形成期間會(huì)釋放額外的EVs。目前，血清的主要應(yīng)用是研究miRNA。要制備血漿，血液需要抗凝。細(xì)胞培養(yǎng)上清分離EVs。污染EVs和可檢測(cè)到的非EV組分的主要來(lái)源是培養(yǎng)基中的血清。如果細(xì)胞不能在無(wú)血清培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，獲取的EVs將不再純凈，后續(xù)研究結(jié)果也將不準(zhǔn)確。建議超速離心從血清中去除EVs或購(gòu)買(mǎi)不含EV血清（WSC0020）；培養(yǎng)中監(jiān)測(cè)細(xì)胞活率，確保大于90%，否則會(huì)釋放凋亡小體和細(xì)胞碎片等其他囊泡，影響實(shí)驗(yàn)。WSR0020-3采用獨(dú)特配方，可減少EVs的損耗；在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，無(wú)蛋白配方可明顯降低毒性反應(yīng)。凍存保護(hù)劑選型若需要進(jìn)行凍干處理，選擇WSR0020-3（凍干兼容）；若用于動(dòng)物注射實(shí)驗(yàn)，選擇WSR0020-3（無(wú)蛋白配方，低內(nèi)）；若-80℃短期保存，選擇WSR0020（經(jīng)典款，性?xún)r(jià)比推薦）。

外泌體研究常見(jiàn)問(wèn)題解答47.外泌體中是否存在18SmRNA？通過(guò)測(cè)序和qPCR分析了外泌體RNA的含量，這些囊泡肯定包括一些18sRNA。早期的論文具有誤導(dǎo)性，一個(gè)團(tuán)隊(duì)聲稱(chēng)外泌體是miRNA和mRNA陰性的。事實(shí)上，外泌體包含核糖體RNA、tRNA和許多非編碼RNA，并且很大一部分miRNA實(shí)際上與蛋白質(zhì)（例如Ago2）相關(guān)，而不是外泌體。8.外泌體研究的困難是什么？（1）外泌體異質(zhì)性，包括來(lái)源異質(zhì)性、大小異質(zhì)性、成分異質(zhì)性等；（2）高純度的外泌體獲取；（3）外泌體鑒定表征；（4）外泌體保存。外泌體研究工具定制化檢測(cè)方案，準(zhǔn)確匹配研究需求，避免功能浪費(fèi)。

外泌體研究常見(jiàn)問(wèn)題解答61.如何鑒定提取出來(lái)的外泌體？根據(jù)MISEV2023，鑒定外泌體首先需要通過(guò)WB來(lái)鑒定細(xì)胞外囊泡的標(biāo)志蛋白是否存在于樣品中，通過(guò)電子顯微鏡來(lái)觀察樣品中細(xì)胞外囊泡的形態(tài)特征，通過(guò)NTA等手段來(lái)分析樣品中細(xì)胞外囊泡的群體特征（粒子濃度、直徑分布等）。一般從外泌體形態(tài)、外泌體粒徑和外泌體標(biāo)志物來(lái)鑒定。（1）鑒定外泌體形態(tài)：通常使用透射電鏡檢測(cè)（TEM）；（2）鑒定外泌體粒徑（大?。┖蜐舛龋嚎梢允褂眉{米顆粒跟蹤分析（NTA）、納米流式、納米庫(kù)爾特粒度儀檢測(cè)；（3）鑒定動(dòng)物細(xì)胞外泌體標(biāo)志物：通常使用WB檢測(cè)外泌體標(biāo)志蛋白（CD63、CD9、CD81、TSG101、Alix等），按國(guó)際細(xì)胞外囊泡協(xié)會(huì)的建議為檢測(cè)3個(gè)陽(yáng)性（一般選擇2個(gè)表面標(biāo)志，1個(gè)內(nèi)部標(biāo)志）和1個(gè)陰性指標(biāo)（Calnexin或GM130）。外泌體研究工具小劑量包裝設(shè)計(jì)，適合少量多次實(shí)驗(yàn)，減少試劑浪費(fèi)。大體積上清Extracellular Vesicles推薦

外泌體研究工具高純度提取試劑盒，減少雜質(zhì)干擾，提升實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。臍帶間充質(zhì)細(xì)胞外囊泡熒光染料

外泌體RNA質(zhì)控解決方案當(dāng)你小心翼翼將微量樣本、花費(fèi)大量時(shí)間提取出外泌體RNA后,還在苦惱RNA質(zhì)量無(wú)法測(cè)定？好不容易進(jìn)行定量檢測(cè)時(shí)，你或許又會(huì)出現(xiàn)260/280值、260/230值較佳，但RNA濃度卻又極低？拜托！下次請(qǐng)一定要試試這款RNA質(zhì)控試劑盒！RNA質(zhì)控原來(lái)如此簡(jiǎn)單！外泌體RNAQC試劑盒是全球、擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)、創(chuàng)新式外泌體表征方法的外泌體RNA質(zhì)控試劑盒!本產(chǎn)品是將外泌體RNA反轉(zhuǎn)后，再使用SYBRGreenI嵌合熒光法qPCR的外泌體RNA質(zhì)控試劑盒。經(jīng)過(guò)大量研究分析，篩選出2個(gè)陽(yáng)性外泌體RNA靶標(biāo)（QCAssayA和B是陽(yáng)性RNA靶標(biāo)的擴(kuò)增引物）和1個(gè)陰性外泌體RNA靶標(biāo)（QCAssayC是陰性RNA靶標(biāo)的擴(kuò)增引物），用于表征外泌體RNA的質(zhì)量。本產(chǎn)品可以對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)，顯著提高了檢測(cè)靈敏度，并省略了PCR反應(yīng)后的電泳步驟，非常適合于外泌體RNA的檢測(cè)。產(chǎn)品信息：ExosomalRNAQCKitV1（WSR0013-1）。臍帶間充質(zhì)細(xì)胞外囊泡熒光染料

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