外泌體研究常見問題解答83.外泌體是如何可視化和/或計數(shù)的？外泌體太?。?0–150nm），無法使用常規(guī)顯微鏡觀察，因為這于大小至少為幾微米的物體。光學顯微鏡的分辨率太低，無法觀察外泌體。外泌體大小分布的典型分析方法包括納米粒子跟蹤分析（NTA）、納米流式和電子顯微鏡。盡管在方法上非常不同，但這些技術都允許你研究尺寸低至10納米的納米顆粒。要確定樣本中外泌體的濃度，可以使用NTA、納米流式。它們通過不同的原理對納米顆粒（10–1000nm）進行計數(shù)和粒徑測定。NTA可能是獲得溶液中顆粒平均尺寸和濃度信息的常用方法。然而，這種方法無法區(qū)分大小相同的囊泡和蛋白質聚集體。因此，我們建議將這種方法與顯微鏡技術相結合，以驗證膜的存在。4.外泌體電鏡是不是一定要有膜結構，無膜結構的球體是外泌體嗎？負染電鏡結果中外泌體的形態(tài)肯定是那種明顯的茶托樣或者大餅樣的！邊緣有一圈略微更明亮的亮圈。如果你打到的結構是沒有膜結構的圓球形，那么您很可能看到了脂蛋白顆?；蛘弑F的蛋白質。外泌體研究工具多場景應用設計，覆蓋基礎研究到臨床前，提升實用性。胞外囊泡應用研究

外泌體的保存是否重要？在外泌體研究中，儲存穩(wěn)定性是一直困擾廣大科研工作者的難題。目前外泌體一般在PBS中，置于-80℃分裝凍存，但隨著凍存時間和凍融次數(shù)的增加，將會嚴重影響外泌體的活性、完整性、貨物含量等。針對上述難點，維思克思開發(fā)出外泌體的凍存保存液，直接混入外泌體樣本中，置于-20℃、-80℃凍存，可明顯改善儲存樣品的短期和長期穩(wěn)定性。產(chǎn)品特點：操作簡便，可直接混入外泌體樣本中，無需過多操作。保護效果好，使用后外泌體生物活性穩(wěn)定，多次凍融后外泌體顆粒數(shù)、表面標志物蛋白均無明顯差異。適用樣本范圍廣，可適用于所有外泌體樣本（包括植物、動物、微生物、人來源外泌體）。產(chǎn)品信息：WisExoExosomeProtector（WSR0020）細胞上清sEVsOEM外泌體研究工具定制化檢測方案，準確匹配研究需求，避免功能浪費。

氯仿買不到？維思克思包有的Trizol法提取RNA是生物實驗中常用的RNA提取方法，然而使用該方法也伴隨著不少困擾。比如，氯仿屬于管制試劑，難以購買！比如，氯仿屬于劇毒試劑，使用時氣味十分難聞！如果你也遇到以上問題，為什么不選擇一款更安全、更環(huán)保、使用效果和氯仿相同的氯仿替代物呢？產(chǎn)品特點：安全環(huán)保，購買方便；傳統(tǒng)抽提試劑氯仿屬于危險化學品，可引起急性中毒以及致。本產(chǎn)品與氯仿相比毒性更小，更安全、環(huán)保；分層效果明顯，本產(chǎn)品有更強的疏水性，水相分層更為明顯，易于吸取，手殘黨友好；RNA質量和得率無差別，提取出的RNA得率及質量與氯仿提取出的五明顯差異，可完全替代氯仿；用量小，一瓶更耐用，相較于氯仿，本品抽提RNA時，操作步驟相同，但用量為氯仿的一半，更耐用；適用范圍廣，可適用于各種動植物細胞、組織以及微生物樣本的RNA提取。產(chǎn)品信息：RNAExtractionAgent（WZ13）。

升級版-外泌體脂質定量試劑盒脂質是外泌體的主要組成部分，可以測量外泌體中脂質含量來對外泌體進行定量和質量表征！從原理上來說，既然蛋白濃度可以一直作為外泌體定量和表征的重要指標。那么用脂質來對外泌體進行定量和表征也是非常可行的。升級版外泌體脂質定量試劑盒突出優(yōu)勢：試劑盒包含獨特的脂質結合熒光探針，該探針分子的熒光背景低，在與脂質結合時發(fā)出明亮的熒光，從而測量樣品的脂質含量。特異性檢測外泌體脂質，該探針只與外泌體脂質結合才能發(fā)光，與其他雜質（核酸、蛋白、糖、鹽等）不結合，可以特異性檢測外泌體脂質。線性范圍廣，靈敏度高，線性范圍：0-1000μg/mL，檢測靈敏度可達50μg/mL。重復性好，CV值低，可以保證脂質測量的準確性。適用于多種脂質類型，外泌體的脂質主要是磷脂，本試劑盒可以檢測到磷脂，用于外泌體定量和表征。同時也可以檢測其他多種脂質。應用范圍：外泌體/LNP脂質定量、外泌體表征產(chǎn)品信息：ExosomalLipidQuantificationKit(Fluorometric)（WSR0028-2）外泌體研究工具高效生產(chǎn)周期，快速響應訂單，滿足緊急實驗需求。

外泌體研究常見問題解答122.做外泌體研究，需要多少量的蛋白質？不建議過多關注蛋白質濃度，我們的經(jīng)驗，蛋白質測量與制劑中外泌體的數(shù)量之間幾乎沒有相關性。蛋白量不應作為制劑中外泌體數(shù)量的估計。外泌體與蛋白量并不總是一個很好的相關性。我們主要使用細胞培養(yǎng)基和尿液作為起始樣本，即使在這種“簡單”的溶液中（至少與血漿/血清相比），相關性也不是很好。這就是為什么我們開始關注細胞培養(yǎng)生長條件，并標準化外泌體收獲條件，以便在正確的時間收獲并提高系統(tǒng)的可重復性。血漿和血清中蛋白質濃度和外泌體含量之間的相關性會更小。許多研究人員使用納米顆粒跟蹤分析（NTA）來測量囊泡的數(shù)量和大小分布，但這種方法不能提供相同大小范圍內任何污染囊泡的信息。因此，電子顯微鏡應始終與這種方法相結合。檢查污染囊泡存在的一種方法可能是進行蛋白質印跡以檢測蛋白質，如gp96，一種ER相關蛋白。3.外泌體WB鑒定時，選擇哪個內參蛋白？無內參蛋白。外泌體包裹的蛋白具有隨機性，同時不同細胞分泌的外泌體具有異質性，所以外泌體中沒有哪種蛋白含量是恒定的，也就沒有所謂的內參蛋白了。目前的外泌體WB鑒定，只能用于定性檢測。外泌體研究工具標準化操作流程，新手也能快速上手，降低培訓成本。牛奶sEVs

外泌體研究工具穩(wěn)定批次生產(chǎn)，確保實驗重復性，降低結果波動風險。胞外囊泡應用研究

外泌體是科學研究的熱點，可怎么才能追蹤到外泌體在體內的蹤跡呢？很多研究者都被這一點給難住了。盡管市面上已經(jīng)有了許多追蹤染料，但這些染料要么就是熒光信號太弱，要么就是背景太高，都存在很多不足。維思克思曾經(jīng)也深受其害，經(jīng)過長時間的沉淀與積累，我們終于帶來由發(fā)明專利“一種pH敏感型探針分子及其應用、一種探針分子的合成方法”轉化而來的示蹤試劑盒！外泌體標記步驟：1試劑準備。使用時將WisTracker提前從-20℃取出，避光解凍后備用。2標記外泌體。將解凍后的WisTracker添加到外泌體溶液中，室溫避光反應30min。3游離探針的去除。推薦用維思克思的WSR0015一步普通離心去除游離探針，得到純凈的熒光標記外泌體。外泌體示蹤步驟：1接種細胞。取合適密度的細胞，接種于共聚焦平皿中置于合適條件下培養(yǎng)。2孵育外泌體。細胞計數(shù)，當細胞生長到70%時，加入熒光標記的外泌體于細胞培養(yǎng)條件下避光孵育2-4h。3清洗與染色。取出平皿，用PBS清洗3次，加入DAPI溶液，室溫避光孵育10min，孵育完成后再用PBS清洗3次。4熒光檢測。在激光共聚焦顯微鏡下觀察細胞和外泌體，并拍照記錄。胞外囊泡應用研究

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