間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體培養(yǎng)基維思克思推出的重磅產(chǎn)品是什么呢？一句話總結(jié)優(yōu)點(diǎn):無(wú)血清、無(wú)異源動(dòng)物成分、化學(xué)成分限定、細(xì)胞倍增時(shí)間短以及外泌體產(chǎn)量高。本品為化學(xué)成分限定培養(yǎng)基，不含血清和血清替代物，無(wú)動(dòng)物源組分，使用過(guò)程中也無(wú)需添加血清或血清替代物；本品主要含有氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽、白蛋白、胰島素和微量元素等。可用于多種來(lái)源的人間充質(zhì)干細(xì)胞傳代培養(yǎng)，如骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BM-hMSC）、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（UCM-hMSC）。產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：質(zhì)量穩(wěn)定，無(wú)外泌體成分影響，細(xì)胞培養(yǎng)和外泌體生產(chǎn)的重復(fù)性強(qiáng)；外泌體產(chǎn)量高，外泌體產(chǎn)量高達(dá)1E+13Particles/L（3D培養(yǎng)）；重復(fù)性好，培養(yǎng)基批次間一致性，成分明確，利于細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程外泌體研究；細(xì)胞倍增時(shí)間短，1:3傳代，需2-3天即可進(jìn)行下一次傳代；研究范圍廣，用于多種干細(xì)胞外泌體規(guī)模生產(chǎn)，外泌體功能研究，外泌體改造等。產(chǎn)品信息：NovMSCsExosomeSFMediumV2（WSC0008-2）。外泌體研究工具高效生產(chǎn)周期，快速響應(yīng)訂單，滿足緊急實(shí)驗(yàn)需求。生姜EVs科學(xué)研究

外泌體研究常見(jiàn)問(wèn)題解答61.如何鑒定提取出來(lái)的外泌體？根據(jù)MISEV2023，鑒定外泌體首先需要通過(guò)WB來(lái)鑒定細(xì)胞外囊泡的標(biāo)志蛋白是否存在于樣品中，通過(guò)電子顯微鏡來(lái)觀察樣品中細(xì)胞外囊泡的形態(tài)特征，通過(guò)NTA等手段來(lái)分析樣品中細(xì)胞外囊泡的群體特征（粒子濃度、直徑分布等）。一般從外泌體形態(tài)、外泌體粒徑和外泌體標(biāo)志物來(lái)鑒定。（1）鑒定外泌體形態(tài)：通常使用透射電鏡檢測(cè)（TEM）；（2）鑒定外泌體粒徑（大?。┖蜐舛龋嚎梢允褂眉{米顆粒跟蹤分析（NTA）、納米流式、納米庫(kù)爾特粒度儀檢測(cè)；（3）鑒定動(dòng)物細(xì)胞外泌體標(biāo)志物：通常使用WB檢測(cè)外泌體標(biāo)志蛋白（CD63、CD9、CD81、TSG101、Alix等），按國(guó)際細(xì)胞外囊泡協(xié)會(huì)的建議為檢測(cè)3個(gè)陽(yáng)性（一般選擇2個(gè)表面標(biāo)志，1個(gè)內(nèi)部標(biāo)志）和1個(gè)陰性指標(biāo)（Calnexin或GM130）。高通量胞外囊泡實(shí)力廠家外泌體研究工具自動(dòng)化數(shù)據(jù)分析兼容，適配主流軟件，提升分析效率。

外泌體研究常見(jiàn)問(wèn)題解答134.當(dāng)我的Westerns似乎不起作用時(shí)，我該怎么辦？這有幾個(gè)典型的原因：（1）添加的樣本量不足。外泌體可能含有相當(dāng)少量的蛋白質(zhì)貨物。對(duì)于初始實(shí)驗(yàn)，我們建議添加盡可能多的樣本。（2）抗體不是比較好的。我們建議測(cè)試2-3家制造商的抗體（如抗CD63或其他外泌體標(biāo)記物），仔細(xì)檢查推薦的濃度。此外，它們比較好是新鮮使用，并且需要妥善儲(chǔ)存。（3）根據(jù)外泌體表面標(biāo)記，某些凝膠條件可能對(duì)靶抗體更為優(yōu)化（例如還原/非還原和變性/非變性）。我們建議與制造商和外泌體社區(qū)核實(shí)您所針對(duì)的特異性標(biāo)記物和您所使用的特異性抗體的推薦條件。（4）一般Westerns技術(shù)。Western可能很棘手，我們建議使用陽(yáng)性對(duì)照進(jìn)行初步測(cè)試，以確保整個(gè)工作流程正常運(yùn)行。任何蛋白質(zhì)或抗體都可以使用，只要它們滿足您需要的條件（例如變性與非變性）。此外，在挑選蛋白質(zhì)時(shí)，盡量避開(kāi)樣本中濃度非常高或非常低的蛋白質(zhì)，以防止印跡過(guò)載或完全沒(méi)有信號(hào)。

大體積外泌體樣本量處理方案大體積外泌體樣本在濃縮后根據(jù)不同應(yīng)用，銜接不同的外泌體分離純化方法，見(jiàn)下文。01外泌體分離純化對(duì)于外泌體的分離純化，市面上已有許多方法。維思克思總結(jié)出常用、簡(jiǎn)便、效果比較好的三種方法。SEC重力柱基于分子排阻色譜原理，根據(jù)被分離組分分子大小差異進(jìn)行外泌體的分離。具有操作簡(jiǎn)便、高純度和高回收率等優(yōu)點(diǎn)，特別適用于大體積樣本中的外泌體分離。SEC離心柱是離心柱式的外泌體分離產(chǎn)品，離心柱中裝填的介質(zhì)能無(wú)差別的吸附雜質(zhì)而不結(jié)合外泌體，實(shí)現(xiàn)超快速、高收率的外泌體分離。磁珠法外泌體分離試劑盒能特異性捕獲外泌體而不吸附雜質(zhì)，實(shí)現(xiàn)高純度、高回收率外泌體分離。具有操作簡(jiǎn)便、高純度和高回收率等優(yōu)點(diǎn)，特別適用于血漿、血清等復(fù)雜樣本中的外泌體分離。02外泌體RNA提取在外泌體RNA提取步驟中，常用的是磁珠法和沉淀法。磁珠法外泌體總RNA提取試劑盒能特異性捕獲外泌體，實(shí)現(xiàn)高純度、高回收率提取，特別適用于血漿、血清等復(fù)雜樣本RNA提取。沉淀法外泌體總RNA提取試劑盒，于外泌體微量RNA的提取，具有提取效率高、提取的RNA種類多、回收的miRNA含量高等特點(diǎn)。外泌體研究工具一站式采購(gòu)方案，省去多渠道比價(jià)，降低采購(gòu)時(shí)間成本。

外泌體研究常見(jiàn)問(wèn)題解答11.外泌體是什么？通常，外泌體被定義為約1.13-1.19g/mL的囊泡（基于密度梯度離心），預(yù)期尺寸為30–150nm（基于電鏡分析）。由活細(xì)胞分泌到細(xì)胞外環(huán)境的膜性小囊泡，是細(xì)胞間信息傳遞的重要載體，參與細(xì)胞間相互作用。幾乎所有類型的細(xì)胞，都可以產(chǎn)生并釋放外泌體。根據(jù)不同生物來(lái)源分類，外泌體分為動(dòng)物細(xì)胞外泌體、植物外泌體、微生物外泌體。動(dòng)物細(xì)胞來(lái)源的外泌體也可以通過(guò)其表面蛋白標(biāo)記物來(lái)定義和鑒定，這些標(biāo)記物包括：四跨肽（CD63、CD81、CD9）和其他類似ALIX、TSG101等標(biāo)記物。目前沒(méi)有合適的工具，也沒(méi)有足夠的知識(shí)來(lái)對(duì)外泌體做出明確而簡(jiǎn)單的定義，將其與其他微/納米囊泡區(qū)分開(kāi)。外泌體研究工具批量訂單快速交付，減少等待時(shí)間，保障研究進(jìn)度。高質(zhì)量Exosome標(biāo)志物

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外泌體研究常見(jiàn)問(wèn)題解答105.外泌體研究，應(yīng)選用血漿還是血清？血清是血液凝固之后收集的液體，所以其中少了纖維蛋白原，凝血因子，以及多了很多凝血產(chǎn)物。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，具有凝血功能。在凝血過(guò)程中血小板會(huì)分泌大量的外泌體，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來(lái)自額外的分泌。血漿=血液-血細(xì)胞血清=血漿-纖維蛋白原-凝血因子所以一般實(shí)驗(yàn)選擇血漿，在特殊情況下，如研究與血小板相關(guān)的疾病的時(shí)候，當(dāng)然是血清更適合。6.外泌體血液樣本提取需注意事項(xiàng)？全血在長(zhǎng)時(shí)間放置，冷凍、離心等會(huì)發(fā)生溶血現(xiàn)象，此時(shí)不建議分離外泌體。7.細(xì)胞培養(yǎng)去除血清源外泌體？a.將細(xì)胞培養(yǎng)用的血清通過(guò)100000g超速離心10h，去除血清外泌體；b.選擇無(wú)血清培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。c.使用商業(yè)化的無(wú)外泌體胎牛血清（WSC0020）8.如何提取組織細(xì)胞外泌體？將組織剪成小塊，在無(wú)血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)12h；轉(zhuǎn)移至離心管中，4℃3000g離心20min去除培養(yǎng)液中雜質(zhì)和細(xì)胞碎片，將上清液用0.45μm過(guò)濾，接著用0.2μm過(guò)濾，然后選擇合適的外泌體分離方法。生姜EVs科學(xué)研究

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